分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室常用設(shè)備之一，在食品、制藥、環(huán)境、生命科學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。分光光度計(jì)是用不連續(xù)的波長(zhǎng)采樣反射物體或透射物體的一種測(cè)量?jī)x器。由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同，對(duì)不同波長(zhǎng)光線的吸收能力也不同，因此，每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長(zhǎng)的混合光中，將每一種單色光分離出來(lái)，并測(cè)量其強(qiáng)度的儀器叫做分光光度計(jì)。分光光度計(jì)可分為紫外分光光度計(jì)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)(或比色計(jì))、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。
分光光度法是比色法的發(fā)展。比色法只限于在可見(jiàn)光區(qū)，分光光度法則可以擴(kuò)展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū)。分光光度法則要求近于真正單色光，其光譜帶寬zui大不超過(guò)3-5nm，在紫外區(qū)可到1nm以下，來(lái)自棱鏡或光柵，具有較高的精度。分光光度計(jì)是用不連續(xù)的波長(zhǎng)采樣反射物體或透射物體的一種測(cè)量?jī)x器。由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同，對(duì)不同波長(zhǎng)光線的吸收能力也不同，因此，每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長(zhǎng)的混合光中，將每一種單色光分離出來(lái)，并測(cè)量其強(qiáng)度的儀器叫做分光光度計(jì)。
分光光度計(jì)使用與維護(hù)：
1、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng)，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“99%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。
2、指針式儀器在未接通電源時(shí)，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
3、比色皿使用完畢后，請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5、WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì)，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大，因而可以用于檢測(cè)微弱光電信號(hào)，而不能用來(lái)檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移，靈敏度下降。針對(duì)其上述特點(diǎn)，在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下，因此在預(yù)熱時(shí)，應(yīng)打開(kāi)比色皿蓋或使用擋光桿，避免長(zhǎng)時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。
6、放大器靈敏度換擋后，必須重新調(diào)零。
7、比色杯的配套性問(wèn)題。比色杯必須配套使用，否則將使測(cè)試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測(cè)試前均應(yīng)進(jìn)行比較。
具體方法如下：分別向被測(cè)的兩只杯子里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長(zhǎng)處，石英比色杯；220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色杯：700nm處裝蒸餾水，將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至99%，測(cè)量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用，若超出此范圍應(yīng)考慮其對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。
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